抗性淀粉(RS)是指在人小腸內不能被酶解的淀粉,在大腸部分或*發酵。RS是總膳食纖維的組分之一。抗性淀粉/酶法分析試劑盒這個方法需要樣品中RS含量多于2% w/w。如RS含量多于2% w/w,常規標準誤差為+5%。少于2% w/w RS的誤差更高。
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樣品使用α-胰淀粉酶和淀粉葡糖苷酶(AMG)37℃振蕩水浴孵育16小時,在這期間,通過兩種酶的聯合作用,非抗性淀粉被溶解,水解成D-葡萄糖,孵育結束后,加入等體積的乙醇或工業甲基化酒精(IMS,變性乙醇)終止反應。離心上述溶液,收集上清勿棄,底部殘留絮狀團即為樣品中的RS,用含水的IMS或乙醇(50%v/v)洗滌絮狀團,洗滌后離心,再重復一次洗滌離心,收集離心后獲得的上清,與之前收集的上清混合。小心倒出試管殘留的液體,將絮狀團置于冰水浴中,加入2M KOH溶解,溶解的同時用磁力攪拌機劇烈攪拌。用醋酸鹽緩沖液將這個溶液調至中性,用AMG將淀粉定量水解成葡萄糖。D-葡萄糖用葡糖氧化酶/過氧化物酶試劑(GOPOD)測定,這也是對樣品中RS含量的測定。非抗性/淀粉(可溶性淀粉)的測定可通過集中的上清液并定容至100mL,再用GOPOD測定D-葡萄糖完成。