1.簡介酶法分析測定乳糖的主要原理為β-半乳糖苷酶催化乳糖和低聚半乳糖水解產(chǎn)生D-半乳糖和D-葡萄糖,通過檢測D-半乳糖的含量計(jì)算計(jì)算低聚半乳糖的含量,其中乳糖需采用GB5413.5中的液相色譜法進(jìn)行測定。目前市場上的D-半乳糖檢測試劑盒檢測速度非常慢。因?yàn)镈-半乳糖包括α-和β-兩種形式,并且自然化學(xué)變旋的概率很低,而β-半乳糖脫氫酶往往只識別β-形式。開始孵育時,由于β-D-半乳糖快速被消
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酶法分析測定乳糖的主要原理為β-半乳糖苷酶催化乳糖和低聚半乳糖水解產(chǎn)生D-半乳糖和D-葡萄糖,通過檢測D-半乳糖的含量計(jì)算計(jì)算低聚半乳糖的含量,其中乳糖需采用GB5413.5中的液相色譜法進(jìn)行測定。
目前市場上的D-半乳糖檢測試劑盒檢測速度非常慢。因?yàn)?span>D-半乳糖包括α-和β-兩種形式,并且自然化學(xué)變旋的概率很低,而β-半乳糖脫氫酶往往只識別β-形式。開始孵育時,由于β-D-半乳糖快速被消耗,因此吸光度值迅速增加,隨后由于α-D-半乳糖轉(zhuǎn)變?yōu)?/span>β-D-半乳糖的速率非常低,因此吸光度值慢慢增加達(dá)到終點(diǎn)。Megazyme低聚半乳糖和半乳糖檢測試劑盒采用專力技術(shù),在試劑盒中加入半乳糖變旋酶,可快速催化限速變旋步驟,室溫下5分鐘即可獲得檢測結(jié)果(見圖1)。